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高压蒸汽灭菌生物指标菌使用规程

点击次数:520  发布时间:2018-10-27

目的:

       建立高压蒸汽灭菌生物指标菌—嗜热脂肪杆菌芽胞菌片的使用规程,保证正确使用,对高压蒸汽灭菌效果进行验证。生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样,不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。

     2.  依据:     

     高压蒸汽灭菌生物指标菌菌片使用说明书。压力蒸汽灭菌器具有造型新颖美观、结构合理、功能齐全、加热迅速、灭菌彻底等优点。适用于医疗、科研、食品、等单位对手术器械、敷料、玻璃器皿、橡胶制品、食品、药液、培养基等物品进行灭菌。

     3.  范围:

     本标准适用于用高压蒸汽灭菌生物指标菌—嗜热脂肪杆菌芽胞菌片对高压蒸汽灭菌效果进行的监测。

      4.  职责:

      压力蒸汽灭菌器操作人员、QA检查员、QC微生物检验员对本标准的实施负责。

      5.  程序:

      5.1.  采用生物灭菌指标菌来检查高压蒸汽灭菌效果是科学、可靠的检测方法。嗜热脂肪杆菌芽胞

  是国际公认的生物指标菌。该菌具有以下特点:   

      5.1.1.  适生长繁殖温度为56℃,培养24小时即可形成菌落。

      5.1.2.  该菌为需氧芽胞杆菌,其细菌繁殖体对培养基要求低,在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上呈米黄色。

      5.1.3.  该菌无毒,热抗性稳定,在4℃冰箱下保存6个月抗力无明显下降,在常温下(20℃左右)可保存1个月。

热死亡时间为121℃,3.9分钟阳性,19分钟阴性,D10值1.3~1.9分钟,符合美国药典规定标准。

      5.2.  结构:本生物指示剂由菌片、恢复培养基和外管组成,菌片由嗜热脂肪杆菌芽胞制备而成,染菌量为5.0×105~5.0×106cfu/片。

      5.3.  使用方法:

5.3.1. 本生物指示剂适用于各型压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。

5.3.2. 使用时,将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心,置于灭菌器的规定位置。

5.3.3. 按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。压力蒸汽灭菌器具有造型新颖美观、结构合理、功能齐全、加热迅速、灭菌彻底等优点。适用于医疗、科研、食品、等单位对手术器械、敷料、玻璃器皿、橡胶制品、食品、药液、培养基等物品进行灭菌。

5.3.4. 灭菌完毕,即刻将生物指示剂取出,盖朝上垂直握于手中,用专门工具或夹子夹住菌管下部,将管内安瓿挤碎,让培养液流出浸没菌片。然后将菌管放于56℃温箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果,48小时观察终结果。

      5.4.  结果判定:培养后生物指示剂的培养液由紫色变为黄色即表示有菌生长、判定为灭菌不合格;仍为紫色者为无菌生长,判定为灭菌合格。

      5.5.  注意事项:

      5.5.1.  生物指示剂管从压力蒸汽灭菌器内取出或从冰箱内取出需在室温下放10min左右,再夹碎安瓿,以免过热或过冷夹碎外管。

      5.5.2.  恢复培养液在56℃培养时间过长(72小时以上),阳性管黄色容易消退,培养液逐渐干燥,应注意每天观察,随时记录阳性结果。

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