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操作技巧|酶标仪维修

点击次数:833次  更新时间:2022-11-23
  酶标仪即酶联免疫检测仪,是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动两大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析,测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
 
  酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,然后由显示器和打印机显示结果。微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单。
 
  酶标仪和普通的光电比色计有以下几点差异:
 
  1)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体。
 
  2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。
 
  3)酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则靠手工移动微孔板来进行测量。
 

ELX-808美国宝特酶标仪

 


 
  在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪,此类酶标仪一般都是自动化型的。它设有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高。
 
  酶标仪维修注意要点:
 
  1、保持避光和干净的室内环境,维持一定的湿度(30%-80%)。
 
  2、维持室内比较恒定的温度,以20-22度为适宜。
 
  3、适用6-384孔板。96孔微孔板内每孔可检测100-300u1溶液,检测体积为200u1。
 
  4、384孔微孔板内每孔可检测50-100u1溶液,检测体积为80u1。
 
  5、检测后的微孔板不要长期置于仪器插槽中,检测完后就从仪器中取出,避免溶液蒸发腐蚀或损坏仪器内部光路系统。如果为有腐蚀性或挥发性溶液,请带盖检测。
 
  6、对于荧光强度检测,使用黑色不透明板。
 
  7、伴随仪器的还有一块紫红色的适配板,在检测96孔板和384孔板时候必须预先置于插槽中,然后再放入微孔板进行检测。
 
  8、在连有电源的情况下,保持仪器24小时开机(对高能氩闪灯源没有损耗),不要罩防尘罩以保持透气和除湿。隔1-2个月关机重启一次即可。
 
  进口酶标仪的检定流程:
 
  1、外观:仪器上应有仪器名,型号,,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤,显示文字应清楚完整。
 
  2、稳定性(漂移):选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.00。
 
  3、吸光度测定的重复性:波长选择同(三),在酶标板*排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。
 
  4、吸光度测定的准确度:选用405,492和620nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。
 
  5、测定速度:选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性。附:200ttg/ml重铬酸钾溶液的配制将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器内冷却30min,在分析天平上准确称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线,摇匀。
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